paeCoe700多模式核壳结构层析填料简要介绍
结构特点:核壳结构聚合物微球为基材,内核为偶联了辛氨基的微球。外为具拦截分子量700kDa微孔情性的壳层,小于拦截分子量的分子可自由进出壳层并与内核上的基团结合。性能特点及应用:®与现有GF相比,高达100倍的样量以及显著改善的流速确保了生产效率显著提高;
②带有多功能配基的内核可高效效的捕获小分子物质,同时目标分子被收集到流穿液中;
◎由于穿流层析和稳定的性能,方便的条件优化,可以使用更大的操作范围。
④:目标产物为大于截留分子量的巨型大分子时,杂质被吸附到内核的活性基团上,目标分子被收集到流穿液中,理论上目标分子的大小不受限制,本产品可以用于纯化任何分子量的巨大分子,包括但不限于病毒等复合体,而且可以用于分离细胞、亚细胞单位,或其他结构复杂的
巨型分子或复合物。
⑤目标产物为小于拦截分子量的生物分子时,目标产物被吸附到在内核上,而细胞碎片等大于拦截分子量的杂质随流穿液被排出。因此,可以粗样品直接进行纯化。此种模式下,结合膨胀床技术或其他返向流操作方法可以建立正4规模生产工艺,特别适用于治疗性抗体等高附加值产品的生产并大幅度提高生产能力。
⑥支持在位清洗。
Core系列层析填料400和 core700是无锡天演生物技术有限公司研发的新一代多模式核/壳结构新型聚合物填料,该产品集核壳结构的分子筛效应和多功能配基辛胺的多模式吸附功能于一身,特别适用于病毒和其他大型生物分子的中间纯化和抛光(精细纯化)。这些特性使得 Core 400700成为分子排阻色谱(sec)填料的升级产品。这类填料非常适用于疫苗生产中病毒纯化的阶段。相对于常规sec,该产品具有多方面突出优势,特别是高流速和高载量方面具优势显著,解决了疫苗生产过程的主要瓶颈。此外,该产品也可用于其他生物大分子如多糖、核酸、卵清蛋白、抗体超大分子量蛋白如卵清蛋白(MW45kDa0)转铁蛋白(MW475kDa)、甲状腺球蛋白(MW660kDa,免疫球蛋白IgG(150kDa)IGA(160kDa)、IgD(184ka),IgE(196kDa)、IgM(190kDa)等等生物大分子的初步纯化或精细纯化。 Core系列的关键性能特点包括:
1. 与 现有GF 相比,高达100 倍的样量以及明显更高的流速确保了生产效率显著提高;
2. 具有激活的配基核心以及未激活的壳层的核心微球技术可 有效的捕获污染物,同时使目标分子流穿液中;
3. 由于穿流层析和稳定的性能,方便的条件优化,可以使用 更大的操作范围。
核壳结构微球技术
Core系列产品由偶联了疏水且带和正电荷配基的多模式模式配基的
核和截留分子量为400k Da或700kDa孔的惰性外壳组成。外壳不允许大分子通过外壳的孔进入内核。这些大分子可在柱内自由流
产品特性
图 1显示了带有惰性壳层的微球、壳层上的孔以及激活的配基核心的 Core 400和 700 原理示意图。较小的蛋白和污染物(以绿色、黄色和紫 色着色)可穿透此核心,目标病毒(红色)以及更大的蛋白则被排除在填料之外并在穿流中收集。
复合模式配基可确保在宽广范围的 pH 值和盐浓度中与大多数杂 质强有力的结合。使用 NaOH(在多数情况下,NaOH 作为一种 溶剂使用)通过在位清洗(CIP)程序,将结合的杂质从微球上除去。表 1 中总结了 Core系列填料 的特点
表 1. Core系列填料 的特点 | ||
Core400 | Core700 | |
Matrix: | 核壳结构的聚合物微球 | |
Ligand: | Octylamine | |
平均粒径 | 90μm | 85μm |
截留分子量 | 400 kDa | 700 kDa |
流速: | prefix = "st1" ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:smarttags" 7050 CM/小时 | 500 CM/小时 |
pH稳定性 | 运行:3 to 13, CIP/在位清洗:3 to 14 | |
化学稳定性: | All commonly used aqueous buffers | |
NaOH: | 1M | |
盐酸胍: | 6 M | |
醇类: | 30% isopropanol, and 70% ethanol | |
禁用: | Oxidizing agents, citrate buffers | |
Storage: | 20% ethanol at 4°C to 30°C | |
载量: /mL胶 | 22 mg卵清蛋10% 流穿,滞留时间3 min | |
流速 | 200 cm/h) | |
HiScreen 预装柱缓冲液: 20 mM Tris�6�2HCl, 150 mM NaCl, pH 7.5. | ||
†pH range where resin can be operated without significant change in function. | ||
§ No significant change in ionic capacity and carbon content after storage 1 week in 1 M NaOH at 40°C. |