P017Heparin-μSphereP017
肝素-μSphere，肝素亲和层析填料
产品概述:
mSphereTM微球是与Source相同的层析填料基材，是集高流速、高载量、高分辨率（3H）于一体的新一代蛋白纯化填料的基础材料。
过去二十多年来，聚合物微球得到了极大的发展并成功应用于生物物质分离和纯化。PAE开发的聚合物微球，简写为mSphereTM,是用聚丙烯酸酯制备的层析介质。与传统的多糖基基材相比，聚合物微球有多方面有点。
产品内容
mSphereTM微球简介
mSphereTM微球是与Source相同的层析填料基材，是集高流速、高载量、高分辨率（3H）于一体的新一代蛋白纯化填料的基础材料。
过去二十多年来，聚合物微球得到了极大的发展并成功应用于生物物质分离和纯化。PAE开发的聚合物微球，简写为mSphereTM,是用聚丙烯酸酯制备的层析介质。与传统的多糖基基材相比，聚合物微球有多方面有点。
PAE生产的用于生物大分子分离的微球是多孔的，有多种粒径和孔径，可达1000Å，根据需要接上了–OH, -COOH或–NH2等基团，以方便偶联其他配体或配基。
利用上述微球，PAE开发了全系列蛋白纯化凝胶，包括但不限于用于亲和层析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤等的层析填料。这些具有3H特性的产品不但可以用于实验室研究，而且在工业规模生产中也有广泛的用途。
理化特性 Physical and Chemical FEATURES
l 高化学稳定性，高pH稳定性
l 高机械稳定性
l 粒径分布单一，变幅极低
l 优化的多孔结构
l 极高的比表面积，载量高于传统的多糖介质
高流速
mSphere具有很高的机械稳定性且粒径单一，因此层析特性。由于其极强的机械稳定性和单一的粒径，mSphere具有极好的抗压缩性能，不易出现堵塞。另外，它可耐操作过程中高至10MPa的压力。因此，mSphere支持高达2000cm/hour的流速。
高载量
mSphere是一种可控制孔径和粒径的单分布多孔微球体，其比表面积高达> 500 m2/g，用其制备的层析填料具有很高的功能集团密度，其动态载量（dynamic binding capacity, DBC）极高。上图是NTA-mSphere和NTA-Sepherose FF对15个His-标签蛋白的载量分布。图中蓝色柱代表NTA-mSphere对某样品的载量占NTA-Sepherose FF载量的倍数，红线是NTA-Sepherose FF的相对载量。可见NTA-mSphere显著超过NTA-Sepherose FF。
高分辨率
mSphere的粒径相对较小（50mm）且分布相当均一（变幅低于5%），而且机械强度高，不易变形，因此分辨率明显高于糖基微球。右图是Ni-mSphere和NTA- Sepherose FF上样量等条件完全均一条件下的洗脱峰。显然，Ni-mSphere的峰形更“sharp”。
其他特点
除上述3H外，mSphere在pH1到14都是稳定的，因此可以用0.5 MNaOH甚至更高的碱浓度进行在位清洗(CIP)。碱液在位清洗是医用产品除热源以及杂蛋白的方法。
适用性强
mSphere的优良特性极为适于制造生物物质的分离和纯化，PAE已经用mSphere开发了多系列层析填料，包括但不限于以下类型：
l 亲和层析填料（AffinitymSphereMedia）
l 离子交换填料（Ion ExchangemSphereMedia）
l 疏水层析填料（HydrophobicmSphereMedia）
l 反向层析填料（Polymer Reversed Phase ChromatographymSphereMedia）
l 分子筛（排阻）层析填料（gel filtrationmSphere Media）
l 功能化磁珠（MeganeticmSphere）
Appendix：
下表是mSphere与Agarose微球与蛋白纯化有关的理化性质的比较。从中可以看出，mSphere具有多方面的优势。
主要基材类型总结与对比
| 类型 | 基材 | 粒径(μm） | pH稳定性 | 压力 | 流速(cm/h) |
| Source 15 | PS/DVB | 15 | 1~14 | 10MPa | 900 |
| Source 30 | PS/DVB | 30 | 1~14 | 10 | 2000 |
| Resource | PS/DVB | 15 | 1~14 | 10 | 1800 |
| MonoBeads | Monodisperse porous PS/DVB | 10 | 1~14 | 10 | 1200 |
| MiniBeads | Monodisperse PS/DVB | 3, non porous | 1~14 | 10 | |
| Fast Flow | 6% cross-linked agarose | 45-165, avr. 90 | 2~13 | 0.3 | 300 |
| Capto | Highly cross-linked agarose with dextran surface extender | 90 (d50V) | 2~13 | 0.3 | 1200 |
| HP | 6% cross-linked agarose | 24-44, avr. 34 | 1~14 | 0.3 | 150 |
| mSphere | Polyacrylate or PS/DVB | 3, 10, 15, 30, 50, 100 | 1~14 | 10 | 1200~2000 |
mSphereTM-为基材的层析填料分类介绍
Introduction to PAE’smSphereTM-Based Chromatography Matrix
PAE提供的层析填料都是以具备3H特征的单分散高交联度聚丙烯酸酯微球mSphere为基材并在其表面加特殊涂层并接枝功能基团或配体制备的。与传统层析填料相比，具有诸多更适于线性放大，加快工艺开发速度。不但适于实验室研究用样品的制备，而且是工业规模纯化蛋白、多肽、核酸、抗生素和低分子量药物不可回避的选择。
基材：mSphere
粒径/孔径：默认50mm，粒径800 Å。可按客户要求提供粒径15mm，30mm，100mm和孔径300、500和800的产品。
详情请访问本公司网站：www.sinopae.com
亲和层析填料 Affinity Chromatography Media
金属螯合亲和层析填料
PAE提供Ni-NTA-mSphere、Ni-IDA-mSphere和IMAC-mSphere三种金属离子亲和填料，分别适用于带His标签蛋白的纯化和金属蛋白的纯化。
PAE的创新技术制备的金属离子亲和填料动态载量比Ni-NTA-琼脂糖FF填料的载量高1倍。详细情况见“mSphereTM微球简介”部分。
关于NTA和IDA填料的讨论，请参阅本公司网站的“NTA vs. IDA- a tale of two ligands” for details.
蛋白配基层析填料
Protein AG-mSphere：
Protein AG-mSphere是一种共价偶联了基因工程改造过的重组Protein AG融合蛋白的填料，其配基带有四个来自Protein A的Fc-binding结构域和两个来自Protein G的Fc-binding结构域，分子量为50.4 kDa。该配基的结合能力对pH的依赖性比Protein A低，也具有不同于Protein A and G的独特性。Protein AG可以与人IgG的所有亚类结合，这对于纯化多克隆抗体或未知亚类的单克隆抗体有其独特支出。Protein AG可以与IgA、IgE、IgM和IgD结合。Protein AG与小鼠除IgA、IgM或serum albumin以外的所有IgG亚类结合，因此可以用于纯化和检测小鼠的IgG抗体而又不受IgA、IgM和血清白蛋白的影响。小鼠的单抗往往对这种嵌合的Protein AG有比Protein A或Protein G更强的结合能力。Protein AG也曾被用来纯化猕猴的IgG。
MabSure-mSphere：
产品编号为P008。其配基是Protein A的一种基因工程改造过的耐碱突变体，适于高碱在位清洗（CIP）。多点偶联使其具有低脱落特性，更适合治疗性抗体对安全性的要求。
与其他Protein A填料一样，MabSure-mSphere可用于抗体的亲和层析纯化，也可以用于研究protein A的免疫吸附。
结合能力：对人IgG、IgG1、IgG2、IgG4高，对IgG3很低。对小鼠IgG1低，IgG2a、IgG2b、IgG3高。对兔IgG高。对大鼠IgG1低，IgG2和IgG2b很低，IgG2c中高。详细情况请参考产品说明书。
Protein G'-mSphere,产品编号：P009。其配基是截短的Protein G的耐碱突变体，多点偶联保证其低脱落，适于高碱在位清洗。可用于抗体的纯化。该配基保留了对IgG的结合能力，但丢掉了对血清白蛋白和Fab结合的结构域。
P010, Protein L-mSphere，耐碱。其配体是基因工程改造过的Protein L，具有耐碱性，可在位清洗。Protein L是Peptostreptococcus magnus的表面蛋白，它可以与免疫球蛋白的L链结合，故名之。天然的Protein L由719 amino acid残基组成，PI为4.0，分子量为95kDa。Protein A和ProteinG与免疫球蛋白的Fc结合，但Protein L与轻链即L链结合，重链的任何部位都与这种结合无关。因此，与Protein A和G相比，Protein L可以与更多类型的抗体结合。例如：IgG, IgM, IgA, IgE和IgD。Fab和scFv也可以与Protein L.结合。
P011：Streptavidin-mSphere，50% slurry。Streptavidin-mSphere是一种用来亲和纯化和定性含有生物素的蛋白或DNA结合蛋白的层析填料。
氨基酸及多肽配基亲和层析填料
P012，Arginine-?Sphere，50% slurry。
P013，GlutaThionine-?Sphere，50% slurry。
用于对GST（Glutathione S-Transferase）标签蛋白亲和纯化的填料，配基为谷胱甘肽转移酶。该填料具有选择性极强，一步即可获得纯度超过95%的融合蛋白，且具有快速、温和、非变性纯化等优点。
该填料亦可用于纯化带有可与谷胱甘肽结合序列的蛋白，例如Glutathione S-Transferase (GST)和glutathione peroxidase和glyoxalase I.
P014-5ml Lysine-?Sphere，50% slurry
其他配基亲和层析填料
Con A-mSphere：
Gelatine-mSphere：
hIgG-mSphere：用于纯化Protein A.
产品编号：P015，Benzamidine-mSphere，50% slurry
离子交换层析填料 Ion Exchange Media
功能基团：CM、S、SP、DEAE和Q
疏水层析填料 Hydrophobic Media
功能基团：Butyl、Phenyl和Octyl
复合模式层析填料 Multimodal Chromatography Media
功能基团：Adhere，MMC
